胞嘧啶碱基编辑器（cytosine base editor, CBE）由四个主要成分构成：dCas9蛋白、sgRNA、胞嘧啶脱氨酶（cytidine deaminase）和尿嘧啶DNA糖基化酶抑制剂（uracil DNA glycosylase inhibitor, UGI）。这些成分在细胞内组装形成融合蛋白，随后在sgRNA的引导下与基因组DNA结合，使得靶序列暴露为单链结构。这时，胞嘧啶脱氨酶能够将单链上的胞嘧啶(C)转变为尿嘧啶(U)，而尿嘧啶在DNA复制或修复过程中最终被转化为胸腺嘧啶(T)，实现了C-G碱基对向T-A碱基对的直接替换。

通过CBE过程中的中间产物脱氧尿嘧啶（dU），研究人员开发了Detect-seq技术，用于CBE体外脱靶检测。该技术首先提取碱基编辑后的细胞基因组DNA，然后对CBE产生的dU进行生物素标记，以富集目标片段。同时在dU位点下游，将正常的胞嘧啶C替换为5-醛基胞嘧啶（d5fC），而后d5fC被化学转化为T。这种方法使得在测序过程中能够识别到大量串联的C-to-T突变，并快速定位碱基编辑位点。

Detect-seq技术相比于GUIDE-seq、Digenome-seq和Cas-OFFinder而言，表现出更高的灵敏度和特异性，同时还具备无偏好性的检测能力。它不仅能够检测Cas9依赖型和非依赖型的脱靶效应，还能识别sgRNA结合区域的外编辑以及靶向链的编辑位点。

在过去两年中，尊龙凯时科技致力于打造一站式基因编辑安全性评估平台，涵盖了靶点设计、靶点筛选、GUIDE-seq脱靶检测（基于细胞的检测）、AID-seq脱靶检测（生化检测）、Detect-seq脱靶检测、脱靶验证、PEM-seq染色体重排检测、载体插入位点检测（升级版LM-PCR及液相杂交捕获测序）、克隆扩增分析、转录组脱靶检测、全基因组测序（WGS）脱靶检测等多项技术。尊龙凯时实验室具备SGS认证、ISO9001质量体系认证及生物安全二级实验室等资质，能够持续稳定地提供优质、高效和安全的服务及产品，满足客户在基因编辑领域的需求。